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CTAB 植物基因組 DNA 快速提取試劑盒

簡(jiǎn)要描述:

CTAB 植物基因組 DNA 快速提取試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:豬骨骼肌細(xì)胞(永生化) γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽6封閉多肽 中央無(wú)漿體PCR檢測(cè)試劑盒 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4) ELISA試劑盒 NO含量活性比色法檢測(cè)試劑盒 葡萄穗霉 豬霍亂沙門氏菌抗體

更新時(shí)間:2024-01-12

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CTAB 植物基因組 DNA 快速提取試劑盒

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

A-Hc2034

CTAB 植物基因組 DNA 快速提取試劑盒

100

6.png


保存條件:本試劑盒在室溫儲(chǔ)存12個(gè)月不影響使用效果。
產(chǎn)品介紹:
 改進(jìn)的經(jīng)典CTAB植物DNA抽提液內(nèi)(添加多種針對(duì)植物特點(diǎn)的多糖、多酚去除成份)迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,氯仿抽提后通過(guò)離心清除多糖、多酚和蛋白質(zhì)(根據(jù)需要,上清中還加入異丙醇離心沉淀基因組DNA,進(jìn)一步去除其它各種雜質(zhì)),然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,進(jìn)一步將多糖、多酚和細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.提取純度高,典型的比值達(dá)1.7~1.9。
2.簡(jiǎn)單快速,單個(gè)樣品操作一般可在1小時(shí)內(nèi)。
自備試劑:氯仿/異戊醇(體積比24:1混合)、無(wú)水乙醇、β-巰基乙醇、RNase A(10mg/ml)。5.png

PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?

試劑:
模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個(gè)引物,分別與模板DNA的兩端配對(duì)擴(kuò)增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過(guò)程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過(guò)程,用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴(kuò)增DNA鏈;PCR buffer溶液:對(duì)PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛,可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測(cè)序等等實(shí)驗(yàn)步驟,常常需要進(jìn)行酶切操作。MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來(lái)判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
設(shè)備:
PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時(shí)不同溫度環(huán)節(jié)的嚴(yán)格控制;電泳槽:用于分離PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動(dòng)提取核酸。  這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學(xué)技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進(jìn)行PCR反應(yīng)并得出準(zhǔn)確結(jié)果。

PCR相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn):

PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由20到35個(gè)循環(huán)組成,每個(gè)循環(huán)包括以下3個(gè)步驟:

一、變性:

利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個(gè)循環(huán)之前,通常加熱長(zhǎng)一些時(shí)間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時(shí)間1-2分鐘,接下來(lái)PCR儀就控制溫度進(jìn)入循環(huán)階段。

二、退火或稱接合,復(fù)性:

在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點(diǎn)5℃。錯(cuò)誤的退火溫度可能導(dǎo)致引物不與模板結(jié)合或者錯(cuò)誤地結(jié)合。該步驟時(shí)間1-2分鐘。

三、延伸:

DNA聚合酶由降溫時(shí)結(jié)合上的引物開(kāi)始沿著DNA鏈合成互補(bǔ)鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時(shí)間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長(zhǎng)度。傳統(tǒng)的Taq估計(jì)合成1000bp/min、較新的Tbr(來(lái)自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

PCR反應(yīng)條件優(yōu)化:

1、變性溫度和時(shí)間:

保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜WC整個(gè)PCR擴(kuò)增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再?gòu)?fù)雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過(guò)高或高溫持續(xù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),可對(duì)Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

2、復(fù)性溫度和時(shí)間:

PCR擴(kuò)增特異性取決于復(fù)性過(guò)程中引物與模板的結(jié)合。復(fù)性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復(fù)性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。

3、延伸溫度和時(shí)間:

一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個(gè)核苷酸時(shí),過(guò)高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時(shí)間,可根據(jù)待擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長(zhǎng)延伸時(shí)間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時(shí)間。這里需要注意,延伸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能出現(xiàn)非特異擴(kuò)增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時(shí)間。

4、循環(huán)數(shù):

其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說(shuō)20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達(dá)到最大值,實(shí)際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達(dá)到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴(kuò)增增加。

公司正在出售的產(chǎn)品:

柯拉松血吸蟲染料法熒光定量PCR試劑盒

毒蕈堿型乙酰受體亞型M3ELISA試劑盒 M-AChR M3免費(fèi)代測(cè)試劑

棒桿菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒

椿皮染料法PCR鑒定試劑盒

補(bǔ)體1抑制物抗體-IgGELISA試劑盒 C1INH-IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

前病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷

西尼羅河病毒PCR檢測(cè)試劑盒

復(fù)合1ELISA試劑盒

木霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒

西部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒

補(bǔ)體蛋白9ELISA試劑盒

牡蠣包拉米蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

程序性死亡因子配體1ELISA試劑盒

犬腺體病毒2型探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

犬利什曼原蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

大腸癌專一抗原2ELISA試劑盒

玉米NOS/SS PCR檢測(cè)試劑盒

犬皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒

膽鹽依賴性脂肪ELISA試劑盒

牛羚關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

裂谷熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒

蛋白激RELISA試劑盒

馬傳染性貧血病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

鏈球菌B組探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

低分子量激肽原ELISA試劑盒

綿羊星狀病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

球孢白僵菌PCR檢測(cè)試劑盒

端錨聚合2ELISA試劑盒

牡蠣皰疹病毒1型探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

柯薩奇病毒A6型和A10PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

人果糖二磷醛縮A(ALDOA)試劑盒ELISA

牛巨細(xì)胞病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

禽杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒

人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒

枳實(shí)探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒

登革病毒2型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

CTAB 植物基因組 DNA 快速提取試劑盒人脯氨羥化(PHD)檢測(cè)試劑盒elisa

雜色青霉PCR檢測(cè)試劑盒

拉蒂諾病毒PCR檢測(cè)試劑盒

P0蛋白抗體(IgG)檢測(cè)試劑盒elisa

伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

血清型耶爾森氏菌ail基因熒光PCR檢測(cè)試劑盒(探針?lè)?/span>)

人白三烯E4(LTE4) ELISA檢測(cè)試劑盒

牛流行熱病毒(BEFV)核檢測(cè)試劑盒

 


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